Uuttomenetelmä hiivan glukaanista

Hiivaglukaanin uuttoprosessista on tehty monia tutkimuksia sekä kotimaassa että kansainvälisesti, mukaan lukien pääasiassa happouutto, alkaliuutto, happo-emäs- kattava menetelmä ja orgaanisen liuottimen uuttomenetelmä.
Hapon uuttomenetelmä
Suoritettiin tutkimus siitä, soveltuvatko etikkahappo, muurahaishappo ja fosforihappo happohydrolyysiin hiivaglukaanin uuttamiseksi. Tulokset osoittivat, että happohydrolyysin jälkeen uutetun hiivaglukaanin päärakenne ja haararakenne olivat periaatteessa ennallaan. Etikkahappoa käytettiin glukaanin uuttamiseen panimohiivasta. Tutkimuksessa havaittiin, että optimaaliset prosessiolosuhteet glukaanin happouutolle olivat: HAc-pitoisuus 6 %, uuttolämpötila 90 astetta, uuttoaika 6 tuntia ja kiinteän nesteen suhde 1:6. Optimaalisessa uuttoprosessissa hiivaglukaanin saanto oli 21,58 %, proteiinipitoisuus 7,21 % ja polysakkaridipitoisuus 71,46 %. Paperikromatografiset kokeet osoittivat, että hydrolyysituote sisälsi sekä mannoosia että glukoosia.
Edellä olevasta voidaan nähdä, että vaikka happouutolla on korkea saanto, se sisältää suuren määrän mannoosia ja proteiinia ja voi myös johtaa polysakkaridien hajoamiseen.
Alkaliuutto
Suspendoi soluseinä 3 % (w/V) NaOH-liuokseen ja jätä se 4 asteeseen 9 päiväksi. Pinnalla oleva suspendoitunut osa poistetaan ajoittain ja jäljelle jäävää osaa sentrifugoidaan 15 minuuttia soluseinän jäännöksen saamiseksi. Lisäämällä aminoetikkahappoa säätämään uutetun liuoksen pH arvoon 10, liuos muuttuu kolloidiseksi. Sentrifugoi 30 minuuttia ja huuhtele huolellisesti suurella määrällä vettä. Liuota se sitten 3-prosenttiseen (w/V) NaOH-liuokseen, ja kun liuoksen pH on säädetty arvoon 10, pektiinifragmentit saostuvat uudelleen. Paperikromatografia osoitti, että 2 mol/l H2S04:lla hydrolysoidun saostuksen päätuote oli glukoosi.
Kotimaiset ja ulkomaiset tutkimukset ovat osoittaneet, että emäksisellä uutolla on korkea puhtaus ja vähän proteiinijäämiä, mutta polysakkaridien saanto on alhainen. Lisäksi suuri määrä alkalista käsittelyä voi saastuttaa ympäristöä ja johtaa polysakkaridien hajoamiseen.
Happoemäksen kattava uuttomenetelmä
Dispergoi hiiva NaOH-liuokseen ja sekoita, lisää sitten vettä ja kerää sakka sentrifugoimalla. Dispergoi sakka NaOH-liuokseen ja kerää se sentrifugoimalla. Pese sakka vedellä kolme kertaa, uuta HCl:lla, kerää sakka sentrifugoimalla ja kuivaa, jolloin saadaan hiiva-(1,3)-D-glukaanituote.
Happo-emäsmenetelmällä uutetulla tuotteella on korkea puhtaus, alhainen proteiinipitoisuus ja korkea saanto. Tämä menetelmä on kuitenkin monimutkainen, hankala käyttää, aikaa vievä ja käyttää useita orgaanisia liuottimia vedenpoistoon, mikä johtaa suureen jätenesteeseen ja ympäristön saastumiseen.
muu
Perinteinen menetelmä hiivaglukaanin valmistamiseksi happo-emäskäsittelyllä vaatii suuren määrän happoa ja alkalia, prosessi on työläs ja työvoimaintensiteetti korkea. Hapon ja alkalin käyttö uuttamisessa voi helposti johtaa polysakkaridien hajoamiseen ja vaikuttaa pektiinin fysiologiseen aktiivisuuteen.